其他型号

产品规格：

0.5ml 3KD
0.5ml 10KD
0.5ml 30KD
0.5ml 50KD
0.5ml 100KD
4ml 10KD
4ml 30KD
4ml 50KD
4ml 100KD
15ml 10KD
15ml 30KD
15ml 50KD
15ml 100KD

离心超滤管

英文名称 ：Amicon Ultra-15ml，10kDa Centrifugal Filter Unit该系列超滤管采用垂直结构的膜减少浓差极化，加快了离心速度,大大了离心所需的时间，整个离心操作大概10-30分钟。倒转离心回浓缩后的样品保证极高的回收率(>90%的高回收率)，浓缩倍数可达25～30倍。内置低吸附的Ultracel-PL超滤膜，分别有3KD、10KD、30KD、50KD、100KD五种截留规格，是蛋白质溶液、细胞裂解液、组织培养液等生物样品浓缩、脱盐和缓冲液更换的理想选择。广泛应用于蛋白、抗原、抗体、酶、病毒和微生物等稀溶液或纯化后的蛋白质（如层析洗脱液）的浓缩、脱盐与纯化。

技术指标：

①大起始样品处理量：15ml(吊篮转子)、12ML（35°固定角度转子），典型浓缩后终体积为200ul；

②内置超滤膜为Ultracel-PL纤维素超滤膜；

③适合50ML离心机转子；

④大离心力：吊篮式转子为4000×g；35°固定角度转子5000×g；

⑤尺寸：有效膜面积为7.6cm2，直径为35mm，长度为121mm；

⑥管壁上标有截留规格。

超滤管大小规格选择注意事项：

若实验需要截留住目标蛋白，Millipore公司建议选择比目标蛋白大小至少小2-3倍纤维素超滤膜材质的超滤管。如果是聚醚砜超滤膜材质超滤管，则所选择超滤管规格大小比目标蛋白至少小4-5倍。

超滤管使用方法和注意事项

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。以下是个人总结的使用方法和注意事项。

1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，常见的是Ultra-15（10kD）。到底选择多大截留分子量比较合适呢？10kDa、 5kDa、还是30kDa？通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。

2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰xiang里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速 rpm换算成g之后，有所不同。具体可参阅附件里的说明书。离心机的加速度调至低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。

4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。

5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再 浓缩至1ml左右，连续三次，后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍 左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。

6、取出终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。后加入MilliQ水到超滤管中，没过 超滤膜，防止膜失水变干。